杜鵑花為杜鵑花科杜鵑花屬常綠或落葉小灌木，具有品種多、開(kāi)花早、花色豐富、花期長(cháng)等特點(diǎn)。近幾年，由于扦插繁殖技術(shù)的發(fā)展，我國杜鵑花產(chǎn)量有了提高。但是，名貴品種因母本少、繁殖系數低，仍不能滿(mǎn)足社會(huì )需要。而組織培養正是實(shí)現快速繁殖的有用途徑.

　　一、杜鵑花組培的基本技術(shù)環(huán)節

　　杜鵑花組織培養，通常使用的外植體為莖尖、莖節和花蕾等。因花蕾的分化較為困難，周期長(cháng)；莖尖的取材受到一定限制，故國內多采用莖節為初代培養的外植體。

　　殺菌處理時(shí)，殺菌能力較強的升汞（氯化汞）易造成外植體材料的褐變死亡，不宜使用。試驗表明，采用飽和的次氯酸鈣液上清液或5％的次氯酸鈉液作為滅菌劑，效果較好，處理時(shí)間為15至20分鐘。為加強滅菌效果，還可加入1％的克菌丹或0.1％的吐溫－20（山梨糖醇）配合使用。材料滅菌前的預處理，通常采用 70％酒精浸泡，不超過(guò)30秒。此外，用中性洗滌劑進(jìn)行材料的預處理，亦可有效降低其滅菌后的污染率。外植材料滅菌流程為：洗衣粉液浸泡20分鐘?流水沖洗至清?70％酒精浸泡30秒?滅菌水沖洗1分鐘?5％次氯酸鈉浸泡15分鐘?滅菌水漂洗3次，每次1分鐘。如此，可將外植體污染率降低到15％以下。

　　杜鵑花組培所用培養基，為Andeson改良MS培養基：將MS培養基中的硝酸銨和硝酸鉀用量分別減至1／4，取消了碘化鉀成分，鐵鹽的用量增加一倍。因杜鵑花科植物原產(chǎn)于高山酸性土壤，培養基的pH值宜為5.0至5.4。培養室溫度25℃，光照強度3000勒克斯，光照時(shí)間12至14小時(shí)。

　　杜鵑花在誘芽培養中使用的激素較一般植物有異，需要活性較強的細胞激動(dòng)素類(lèi)物質(zhì)，才能達到滿(mǎn)意的效果。試驗表明，使用ZT的誘芽效應最為顯著(zhù)；添加KT的處理幾乎無(wú)叢芽或側芽發(fā)生，僅是原莖尖的伸長(cháng)；而選用6－BA處理，則導致培養材料的褐變加劇，效果反不如對照。此外，在其后的增殖培養中，杜鵑花對細胞激動(dòng)素種類(lèi)的要求，仍以添加ZT為好。

　　國外在杜鵑花的組培中多使用2ip作為外源細胞激動(dòng)素，效果較ZT好。但從經(jīng)濟的角度考慮，仍推薦使用ZT。

　　二、杜鵑花的初代和繼代增殖培養

　　杜鵑花初代誘芽培養，NAA濃度不得超過(guò)0.1mg／L，ZT用量的增大對誘芽效應有明顯促進(jìn)作用。但提高ZT濃度時(shí)，NAA濃度不宜同步增加，ZT／NAA值較大為好。從經(jīng)濟培養的意義出發(fā)，初代培養的激素配比以ZT5＋NAA0.01（mg／L）為宜，培養1個(gè)月左右時(shí)，誘芽率即可達 100％，誘芽系數6.5。

　　杜鵑花繼代增殖培養，對細胞激動(dòng)素要求比初代培養有所下降。雖然增殖效應仍隨ZT用量的增加而上升，但已不如初代培養時(shí)那么明顯。此外，用于增殖培養的材料性質(zhì)不同，其增殖效應也不盡相同，品種間亦存在顯著(zhù)的差異性。供試品種中，‘小桃紅’以采用叢芽為增殖培養體時(shí)的增殖系數較高（7.6）；而‘花春雨’ 則反之，以取用芽條時(shí)的反應為佳（7.5）。

　　杜鵑花組織培養，從接種到誘芽產(chǎn)生，所需的時(shí)間明顯長(cháng)于月季和菊花等，故其繼代增殖培養的周期也較長(cháng)。試驗中分別以30天和45天為培養周期進(jìn)行了統計，在各激素水平配比處理中，其增殖芽總數，培養45天要比培養30天的高出50％至80％。所以，杜鵑花組培過(guò)程中，過(guò)于頻繁地切割、轉換培養，反達不到快繁的目的。

　　三、試管苗的生根培養及移栽

　　杜鵑花的生根培養雖不十分困難，但對培養基的要求仍與一般植物不同。其一，基本培養中無(wú)機鹽大量元素的用量不能減半；其二，蔗糖的用量仍為30g／L，生長(cháng)素NAA的添加量以1.5至2.0mg／L為好，培養45天時(shí)的生根率為60％左右。

　　供生根培養的試管苗，要求高15厘米以上，具7片以上真葉，發(fā)育健壯。生根培養2周后始見(jiàn)發(fā)根，6周時(shí)達最高生根率。試驗中曾發(fā)現，在增殖培養過(guò)程中用 KT或6－BA取代ZT時(shí)，雖誘芽、增殖效應較差，但芽條發(fā)育較粗壯。因此，在增殖培養達到一定群體數量后，用KT或6?BA進(jìn)行繼代培養處理，可使生根率和移栽成活率明顯提高。此外，在生根培養基中添加2g／L的活性炭，可使試管苗個(gè)體發(fā)育顯著(zhù)增強，1個(gè)月后生根率可達到90％以上。

　　國外的研究資料表明，某些常規繁殖（扦插）極難生根的植物，經(jīng)組織培養后獲得的試管苗，生根會(huì )容易很多。有些可不經(jīng)生根培養直接移植到生根介質(zhì)中，生根率可達100％，3至4周后即可移入溫室進(jìn)行盆栽。這種生根介質(zhì)為泥炭土、蛭石、珍珠巖的混合物，pH以4至4.5為宜。

　　生根試管苗的移栽入土，栽培基質(zhì)為1∶1的泥炭生＋蛭石混合物。表層要求過(guò)篩，以利根系附著(zhù)；下層鋪粗粒，以利基質(zhì)滲水。移栽時(shí)用鑷子去掉根部附著(zhù)的培養基（不可損傷根系）。用鑷尖將基質(zhì)撥一小洞，把根系放入，覆土，輕輕壓實(shí)，澆足水。試管苗移栽成活的關(guān)鍵是保證一定的溫、濕條件，移栽環(huán)境和試管培養時(shí)的條件相差懸殊，常造成移栽苗生長(cháng)不適或死亡。?

　　試管生根苗的移栽雖然在全年均可進(jìn)行，但在不具備生根室的情況下，仍以春、秋兩季進(jìn)行較為穩妥方便。?

　　四、組培技術(shù)在杜鵑花新品種選育中的應用

　　試驗初期，鑒于杜鵑花外植體滅菌困難，可供試驗的接種群體太小，不能滿(mǎn)足正常試驗的進(jìn)行。為盡快篩選出合適的培養基配方及相應的培養條件，筆者結合雜交育種，采用雜交種子試管發(fā)芽的方法，再用試管實(shí)生苗的上胚軸為外植體進(jìn)行研究，取得了事半功倍的效果。筆者發(fā)現，杜鵑花的雜種實(shí)生苗常規播種繁殖需3至5年才能開(kāi)花，而經(jīng)上胚軸培養的雜種實(shí)生苗，移栽后第二年即可開(kāi)花，大大縮短了雜種實(shí)生苗的童期，對加快顯花、結果類(lèi)植物的育種進(jìn)程具有重要意義。

　　一般來(lái)說(shuō)，種子的滅菌處理較其他器官或組織容易得多。杜鵑花雜交種子的滅菌處理為：70％酒精表面浸泡1分鐘，滅菌水漂洗后轉0 ．1％升汞液浸泡10分鐘，滅菌水漂洗3次，每次1分鐘以上。滅菌后再剖實(shí)取籽、接種培養，接種兩周始見(jiàn)發(fā)芽。出苗后取用上胚軸進(jìn)行誘芽快繁，繁殖系數較高。成苗后，可取莖尖或莖節再培養，培養條件和方法同前。國內組織培養涉及新品種選育的不多，特別是在觀(guān)賞園藝植物方面。從發(fā)展的角度看，組培技術(shù)要保持較強的生命力，就不該離開(kāi)新品種的選育。因此，有機地將組培技術(shù)與杜鵑花新品種選育結合起來(lái)，對提高綠地植物景觀(guān)的建設水平、促進(jìn)杜鵑花的產(chǎn)業(yè)化發(fā)展，都是十分有益的。