孫瑞芳
　�。ㄖ貞c市園林綠化科學(xué)研究所　400038）

　　摘要：組培快繁技術(shù)研究結果表明：適宜鉆石玫瑰離體芽誘導分化的培養基為MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.10～0.20mg/L；適宜叢生芽繼代增殖的培養基為MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.10～0.20mg/L；適宜試管苗生根的培養基為1/2MS+NAA0.10mg/L，其生根率達90%。

　　關(guān)鍵詞：鉆石玫瑰；組培快繁；培養基；誘導分化

　　鉆石玫瑰（Rosa sp.），薔薇科薔薇屬多年生花卉，為微型月季的一種，因其花枝短小,花朵如豆扣般大小,故美其名曰“鉆石玫瑰”或“袖珍玫瑰”。鉆石玫瑰除具有一般月季花容秀美、芳香馥郁、四季常開(kāi)等特點(diǎn)外,還具有分枝多、株型矮小緊湊、耐寒、耐熱、適應性強等優(yōu)點(diǎn),是現代城市綠化不可替代的材料，深受人們的喜愛(ài)[1]。目前鉆石玫瑰主要靠扦插繁殖,繁殖率低、速度慢,且后代出現品質(zhì)降低現象，遠遠不能滿(mǎn)足市場(chǎng)的需求。為此,我們開(kāi)展了鉆石玫瑰組培快繁技術(shù)研究,擬用工廠(chǎng)化育苗措施解決常規生產(chǎn)所面臨的問(wèn)題。

　　1　材料與方法

　　1.1　外植體的建立

　　供試材料采自重慶市園林綠化科學(xué)研究所品種圃從北京引進(jìn)已栽培馴化2年的鉆石玫瑰品種“紫色時(shí)代”當年生植株。

　　剪取優(yōu)良健壯株當年生枝條中段帶側芽的未木質(zhì)化或半木質(zhì)化莖段,用毛刷蘸肥皂水輕輕刷洗后流水沖洗1～2h,再剪成1.0～1.5cm左右帶腋芽的莖段;超凈臺上，將莖段先用70%酒精溶液浸泡30s,無(wú)菌水沖洗2～3次，再置于0.1%升汞溶液中消毒9～12min,然后用無(wú)菌水沖洗3～4次,以備接種。

　　1.2　離體芽的誘導培養

　　將無(wú)菌莖段接種于誘導培養基上誘導萌芽。誘導培養基以MS為基本培養基,附加不同濃度的細胞分裂素6-BA和生長(cháng)素NAA，共組成5種培養基：MS+6-BA0.30mg/L+NAA0.10mg/L,MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.10mg/L,MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.20mg/L,MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.20mg/L ,MS+6-BA2.00mg/L+NAA0.10mg/L。每種培養基均接種20個(gè)離體芽,培養6周后統計芽誘導分化率（見(jiàn)表1）。

　　1.3　叢生芽的繼代增殖培養

　　將誘導培養基上已萌發(fā)的嫩芽切下轉接到4種繼代培養基中繼代增殖。繼代培養基分別MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.10mg/L,MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.10mg/L,MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.20mg/L，MS+6-BA2.00mg/L+NAA0.20mg/L。每種培養基接種30個(gè)嫩芽,接種時(shí)單芽莖段長(cháng)0.5～1.0cm左右,培養3周后統計叢生芽的數量以及高于2cm的芽數（見(jiàn)表2）。

　　1.4　試管苗的生根培養

　　選取繼代培養中生長(cháng)健壯的叢生芽,剪成1.2～1.5cm長(cháng)的單芽莖段，轉接到生根培養基上。培養基配方為：1/2MS+NAA0.10mg/L，1/2MS+IBA0.1mg/L，1/2MS+NAA0.20mg/L，1/2MS+IBA 0.20mg/L，1/2MS+NAA0.50mg/L，1/2MS+ IBA0.50mg/L。每種培養基接種30個(gè)莖段，接種15天后統計幼苗生根情況（見(jiàn)表3）。

　　以上MS培養基中的白砂糖濃度均為30.0g/L，1/2MS培養基中白砂糖濃度為20.0g/L，瓊脂均為3.5g/L,pH5.8，培養室溫度23（±2）℃,光照強度2000～2500Lx，光照時(shí)間10～12h/d。

　　2　結果與分析

　　2.1　離體芽的誘導結果

　　鉆石玫瑰離體芽的誘導較慢,接種4周后離體芽才開(kāi)始萌動(dòng)，但芽萌動(dòng)后的生長(cháng)情況因培養基內激素濃度的不同而不同。由表1可知，MS+6-BA0.30mg+NAA0.10mg/L培養基叢生芽少,由于6-BA濃度太低，芽分化相對較差，分化率為70%,但叢生芽在培養基中生長(cháng)健壯；在MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.20mg/L培養基上,叢生芽相對較少,芽分化率為105%,且叢生芽生長(cháng)細弱，說(shuō)明該培養基中6-BA和NAA濃度配比不當；在MS+6-BA2.00mg/L+NAA0.10mg/L培養由于6-BA濃度過(guò)高,離體芽萌動(dòng)后僅產(chǎn)生愈傷組織,未分化出叢生芽；MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.10mg/L和MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.20mg/L兩種培養基上,20個(gè)離體芽分化出的叢生芽分別為49個(gè)和39個(gè)，分化率分別達245%和195%,且叢生芽生長(cháng)健壯。重復試驗，篩選出適宜離體芽誘導的培養基為MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.10～0.20mg/L。

　　2.2　叢生芽的繼代增殖結果

　　從表2可以看出，鉆石玫瑰在所采用的4種繼代增殖培養基上培養3周后，芽的增殖倍數和大于2cm芽的比率存在差異。其中：MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.10mg/L和MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.20mg/L兩種培養基上，增殖的叢生芽多，且芽生長(cháng)健壯，芽的增殖倍數分別為5.67倍和5.2倍，大于2cm的芽占75.29%和71.79%，明顯高于其它培養基；在MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.10mg/L培養基上，芽生長(cháng)細弱，叢生芽少，增殖倍數僅為2.1倍，大于2cm的芽占18.75%；MS+6-BA2.00mg/L+NAA0.20mg/L培養基由于6-BA濃度過(guò)高，繼代芽產(chǎn)生愈傷組織后停止生長(cháng)分化。重復試驗，篩選出適宜鉆石玫瑰繼代增殖的培養基為MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.10～0.20mg/L。

　　2.3　試管苗生根培養結果

　　從表3看出，鉆石玫瑰在所用的6種培養基上培養15天后統計結果，試管苗的生根率為13.3%～90%，生根數為4～243根，平均根長(cháng)為0.26～1.5cm。在1/2MS+NAA0.20mg/L、1/2MS+NAA0.50mg/L、1/2MS+IB0.20mg/L、1/2MS+IBA0.50mg/L培養基上，試管苗10d開(kāi)始生根,生根率分別為60%、23.3%、13.3%和30%，根數分別為90根、14根、4根和27根，平均根長(cháng)分別為0.35cm、0.26cm、0.6cm和0.45cm，且由于生長(cháng)素濃度過(guò)高，15d后根均變成深褐色，停止生長(cháng)后慢慢死亡。在1/2MS+IBA0.10mg/L和1/2MS+NAA0.10mg/L培養基上，培養9d開(kāi)始生根,根系發(fā)達,發(fā)育良好,生根率達63.3%和90%,平均根數8根和9根,平均根長(cháng)1.1cm和1.5cm，均明顯高于上述4種培養基，且小苗和根長(cháng)勢均良好。重復試驗，在設計的6種培養基中, 1/2MS+NAA0.10mg/L培養基上生根最好。

　　2.4　生根試管苗的馴化移栽

　　將生根試管苗放在室外光線(xiàn)明亮的地方，閉瓶煉苗2～3d，再逐漸開(kāi)瓶煉苗2～3d，讓植株經(jīng)受試管外環(huán)境的鍛煉后取出試管苗洗凈基部粘附的培養基，移植于珍珠巖：腐殖土：爐雜為1：3：3的基質(zhì)中，澆濃度為0.8g/kg多菌靈溶液，遮蔭保濕，空氣濕度保持在60%～70%，當植株萌發(fā)新根后讓其逐漸見(jiàn)光，并降低濕度，直至暴露在外界條件下，移栽成活率可達75%～80%。

　　3　小結與討論

　　3.1　細胞分裂素6-BA和生長(cháng)素NAA作為外源激素加入培養基后,對鉆石玫瑰離體芽的誘導及分化影響十分顯著(zhù)。適宜鉆石玫瑰離體芽誘導的培養基為：MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.10～0.20mg/L；最佳繼代增殖培養基為MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.10～0.20mg/L。

　　3.2　鉆石玫瑰在試管內生根需較低濃度的生長(cháng)素NAA和IBA，當NAA或IBA大于2.0mg/L時(shí)，鉆石玫瑰雖能產(chǎn)生根,但根隨即變褐停止生長(cháng)后死亡。試驗結果表明，誘導鉆石玫瑰試管苗生根的最佳培養基為1/2MS+NAA0.10mg/L，生根率可達90%。

　　3.3　用組織培養方法可以提高鉆石玫瑰的繁殖速度，且植株根系發(fā)達，苗木生長(cháng)健壯、整齊,是批量繁殖鉆石玫瑰商品苗的一種好方法。

　　參考文獻

　�。�1］網(wǎng)絡(luò )農業(yè)，“鉆石玫瑰”鄭州受歡迎［J］，河南科技2006．6下.
　�。�2］楊永花,朱亞靈，豐花月季組培快繁技術(shù)研究初報［J］，甘肅農業(yè)科技，2000（5）：45～46.
　�。�3］王繼煌，怎樣培育好鉆石玫瑰［J］，廣西園藝，2003（6）：31～32.