王紅
（長(cháng)春市園林科學(xué)研究所）

　　摘要：以抗寒月季帶腋芽莖段為外植體。結果表明：在MS+6-BA1.0~3.0mg/l+NAA0.10mg/l培養基上進(jìn)行起始培養，其腋芽生長(cháng)到2~3cm時(shí)轉接到MS+6-BA2.0-3.0mg/l+NAA0.1mg/l的培養基上進(jìn)行繼代增殖培養,30天其增殖倍數在3~4倍以上,且長(cháng)成的芽苗比較粗壯;增殖后的芽苗在1/2MS+NAA0.5~1.0mg/l或IBA0.5~0.8mg/l的培養基上培養,根系生長(cháng)良好,30天小苗發(fā)根率達90%以上,經(jīng)煉苗后移栽在以草碳和珍珠巖(體積比1:1)基質(zhì)中,成活率達85%以上,當小苗長(cháng)到10cm左右移植于田間栽培,60~90天后可陸續現蕾開(kāi)花.

　　關(guān)鍵詞:抗寒月季；組織培養；快速繁殖；帶腋芽莖段

　　月季是薔薇屬的木本花卉,有“花中皇后”的美譽(yù),深受人們的喜愛(ài).為我國十大名花之一,在我國有30多個(gè)城市將其選為市花�？购�月季是近幾年選育出來(lái)的能夠適應北方寒冷氣候特點(diǎn)的新的月季品種,以其花大,色艷、花期長(cháng)被北方園林綠化彩化中廣泛應用，但由于其繁殖以扦插繁殖為主，繁殖速度慢，滿(mǎn)足不了生產(chǎn)發(fā)展的需要，而組織培養可在短期內獲得大量的優(yōu)良種苗，為此，我們于2003~2006年開(kāi)展了抗寒月季組培快繁的研究工作。

　　1　材料與方法

　　1.1　材料

　　試驗所用的材料為長(cháng)春市園林科學(xué)研究所抗寒月季基地抗寒月季新品種。

　　1.2　方法

　　1．2．1　外植體的準備

　　取生長(cháng)健壯優(yōu)良母株上帶有腋芽的嫩莖，摘除葉片和嫩刺，用自來(lái)水沖洗干凈后，用浸有75%的酒精棉球擦拭表面5~10S，剪成3~5cm左右的莖段，在超凈工作臺上，用0.1%升汞溶液消毒10~12分，無(wú)菌水沖洗3~5次，再用無(wú)菌濾紙吸干表面水分，切成帶有1個(gè)或2個(gè)腋芽的莖段接種到培養基中。

　　1．2．2　腋芽的分化與增殖

　　把外植體分別接種于添加6-BA和NAA的MS培養基上進(jìn)行起始培養，誘導腋芽萌發(fā)建立無(wú)菌快速繁殖無(wú)性系，再將無(wú)菌小苗剪切成1~2cm左右的小段接種到添加不同6-BA和NAA的MS培養基中進(jìn)行繼代增殖培養，培養一定時(shí)間后對小苗的增殖與生長(cháng)情況進(jìn)行觀(guān)察統計分析，培養基含30g/l糖、8g/l瓊脂、pH值5.8~6.5、培養溫度（25+-3），每天光照為11~12小時(shí)，光照強度1000~1500LX。

　　1．2．3　生根與移栽

　　將增殖后長(cháng)勢旺盛、節間紳長(cháng)適度的無(wú)根小苗轉接到1/2MS培養基中誘導生根，30天后觀(guān)察生根情況。

　　生根后的試管苗在常溫下煉苗5~7天，移栽到草碳+珍珠巖（體積比為1∶1）的基質(zhì)中，待成活后小苗高達10cm左右移到田間種植。

　　2　結果與討論

　　2．1　腋芽分化

　　將外植體接種到MS+2.0 mg/l6-BA+0.1mg/lNAA的培養基上培養7天后，大部分外植體開(kāi)始萌動(dòng)，10天腋芽膨大明顯，隨后長(cháng)出嫩芽形成無(wú)根芽從。

　　為選擇出不同質(zhì)量濃度6-BA對誘導腋芽分化的影響，以MS為基本培養基配制7種附加不同質(zhì)量濃度（分別為0.1  0.5  1.0  1.5  2.0  3.0  4.0）的6-BA與0.1mg/lNAA配組的腋芽誘導培養基,每組培養基接種40個(gè)外植體,培養40天觀(guān)察其腋芽分化情況（見(jiàn)表1）。

　　表1表明,月季腋芽分化率與培養基中6-BA質(zhì)量濃度呈拋物線(xiàn)關(guān)系,6-BA由0.1增加至3.0時(shí)腋芽分化率明顯提高,以3.0為最高,腋芽分化率達77.5%;當6-BA的質(zhì)量繼續增加時(shí),其腋芽分化率則明顯下降;6-BA質(zhì)量濃度為0.1時(shí)其腋芽分化率最低,僅為7.5%;6-BA質(zhì)量濃度為5.0時(shí),其腋芽分化率只為15%,可見(jiàn),培養基中6-BA質(zhì)量濃度為1.5~3.0時(shí)有利于誘導腋芽分化,尤其以2.0~3.0時(shí)為最佳。

　　2.2　繼代增殖培養

　　取自同一種培養基上長(cháng)勢、大小一致的繼代培養芽和莖段，同時(shí)接種到不同質(zhì)量濃度的6-BA、NAA的MS培養基中，培養30天后進(jìn)行觀(guān)察并統計結果（見(jiàn)表2）。

　　由表 2可以看出，在NAA質(zhì)量濃度相同而6-BA質(zhì)量濃度不同的處理中，隨著(zhù)6-BA濃度的升高（1.5~3.0）芽苗的增殖倍數也相應提高，NAA為0.05~0.1、6-BA為3.0的處理芽苗增殖倍數高達6.6~6.8倍；可見(jiàn)，培養基中6-BA質(zhì)量濃度為3.0、NAA質(zhì)量濃度為0.05時(shí)為最佳的誘導腋芽分化的處理組合。

　　2．3　生根培養

　　無(wú)菌芽苗在分化與增殖培養基中只誘導地上部分，既不斷地分枝增殖，曾多次出現現蕾、開(kāi)花現象，但均不易生根。因此，將原來(lái)培養基中的大量元素減半（既1/2MS），并去除BA進(jìn)行根的誘導。結果在無(wú)菌苗根的誘導過(guò)程中，生長(cháng)素的種類(lèi)和使用濃度起決定性作用，為此對不同種類(lèi)的生長(cháng)素NAA、IBA、A、IAA的根效應作對比試驗，結果表明，NAA、IBA對抗寒月季無(wú)菌苗誘根效應明顯優(yōu)于IAA，但兩者之間差異不明顯，用IAA進(jìn)行根的誘導，芽苗基部長(cháng)出較多的愈傷組織，發(fā)根率低，且發(fā)根量少，移栽成活率下降，這可能是因為生長(cháng)過(guò)多的愈傷組織影響根系維管束的發(fā)育所致，為為了解NAA和IBA的適宜質(zhì)量濃度，進(jìn)行了NAA和IBA的質(zhì)量濃度試驗，分別設置0.1、0.2、0.3、0.5、0.75、1.0、1.5等7種質(zhì)量濃度進(jìn)行比較，培養30天后觀(guān)察根系生長(cháng)情況，表3表明，以1/2MS（大量元素用量減半）+NAA和1/2MS（大量元素用量減半）+IBA培養基對月季根的誘導效果均較為理想，而且濃度都在0.3-0.75mg/l范圍內最為適合，但以NAA為最佳。其中NAA生根率最高達92%，移栽成活率高達89%，IBA的生根率也高達90%，移栽成活率達87%。

　　將小苗接種到上述培養基中10天后其基部傷口基本愈合，18天則長(cháng)出許多小白根，培養30天發(fā)根率均達90%以上，且長(cháng)有3條以上，長(cháng)度達2.0cm以上白根的占80%以上。

　　2．4　煉苗移栽

　　在生根培養基中，無(wú)菌苗生長(cháng)迅速，植株逐漸健壯起來(lái)，其根系生長(cháng)尤為迅速，在多數根系長(cháng)達1.0cm，其根尖仍保持旺盛生長(cháng)狀態(tài)，此時(shí)即可進(jìn)入過(guò)度栽培（煉苗）階段，移栽前先將瓶苗移出恒溫培養室，在常溫下置于較強散射光中煉苗7天，打開(kāi)瓶蓋后繼續煉苗2~7天，然后小心取出放入清水中清洗干凈，注意少傷根，移栽到以草碳土+珍珠巖（體積比1∶1）的基質(zhì)中，澆透水并覆蓋塑料膜，保持相對濕度85~90%，溫度15~25℃，10天后逐漸揭膜煉苗，15~20天可將塑料膜全部揭除，并澆施營(yíng)養液補充營(yíng)養，其成活率一般可達70%以上，待小苗長(cháng)至10~15cm左右時(shí)，就可移植到田間定植。

　　參考文獻

　�。�1］李正平.月季試管繁殖和移栽中幾個(gè)因素的研究［J］.園藝學(xué)報，1988，15（2）：131