在組培工廠(chǎng)生產(chǎn)管理和植物組織培養實(shí)驗室管理中，安全管理應該是放在第一位的。組培工廠(chǎng)和植物組織培養實(shí)驗室中所進(jìn)行的實(shí)驗通常包括培養基的配制和消毒、外植體的采集和表面消毒、接種和培養等。在這些常規的實(shí)驗步驟中，如果不注重安全管理，經(jīng)常會(huì )發(fā)生一些事故，輕則造成財產(chǎn)損失，重則危及生命。以下根據筆者多年的教學(xué)、科研和生產(chǎn)工作經(jīng)驗，談?wù)勚步M培工廠(chǎng)和植物組織培養實(shí)驗室中幾種主要危險源及其注意事項。

　　1、高溫高壓滅菌鍋

　　高溫高壓滅菌鍋是影響組培工廠(chǎng)及植物組織培養實(shí)驗室安全最重要的設備，其日常維護應做到位，日常使用必須嚴格按操作規程進(jìn)行。滅菌器的使用應由經(jīng)培訓合格的人員操作，整個(gè)滅菌過(guò)程應由專(zhuān)人看管。尤其值得注意的是，每周在夾層有壓力時(shí)拉動(dòng)安全閥手柄數次，以確保安全閥工作正常，以防蒸汽壓力超過(guò)額定壓力，使鍋體爆炸破裂；滅菌完成后，必須關(guān)閉電源，放完鍋內的蒸汽，使壓力下降為零時(shí)開(kāi)啟鍋門(mén)，切忌強行開(kāi)門(mén)，以防高壓蒸汽對人體和設備造成危害。連續使用時(shí)間應小于8小時(shí)／每天，使用一年之后，每年要請有資格的檢測部門(mén)做一次全面系統的檢查，超過(guò)使用壽命后應該及時(shí)報廢。

　　2、用于實(shí)驗室消毒的消毒劑

　　用于實(shí)驗室消毒的常規消毒劑包括紫外線(xiàn)、甲醛和高錳酸鉀、新潔爾滅（苯所溴銨溶液）等。

　　2.1 紫外線(xiàn)

　　紫外線(xiàn)波長(cháng)在100～400 nm之間。紫外線(xiàn)之所以能夠滅菌，是由于它能引起細菌或病毒的遺傳物質(zhì)DNA和RNA的結構變化，包括堿基損傷如丟失與改變、單鏈或雙鏈斷裂與交聯(lián)及各種光產(chǎn)物的形成等，從而影響DNA復制、RNA轉錄和蛋白質(zhì)的翻譯，導致病菌或病毒死亡。另外，紫外線(xiàn)輻射所產(chǎn)生的臭氧和各種自由基可損傷蛋白質(zhì)和酶分子，導致功能改變。因此，紫外線(xiàn)與生物物質(zhì)的作用是通過(guò)DNA生物分子等對紫外線(xiàn)直接吸收導致DNA損傷的直接作用，以及被某些色素吸收導致活性氧產(chǎn)生，與周?chē)鶧NA、蛋白質(zhì)、酶、細胞膜等生物分子反應的間接作用進(jìn)行的。紫外線(xiàn)不僅對微生物有致命影響，對人也有一定的致癌作用。 因此，當植物組織培養或細胞工程實(shí)驗室在用紫外線(xiàn)消毒期間，工作人員不要處在正消毒的空間內，更不要用眼睛注視紫外燈，也要避免手長(cháng)時(shí)間在開(kāi)著(zhù)紫外燈的超凈工作臺內進(jìn)行操作。一般在接種室用紫外線(xiàn)消毒后，不要立即進(jìn)入接種室，此時(shí)室內充滿(mǎn)高濃度的臭氧，會(huì )對人體，尤其是呼吸系統造成傷害。應在關(guān)閉紫外線(xiàn)燈15～20分鐘后再進(jìn)入室內。

　　2.2甲醛和高錳酸鉀

　　植物組織培養或細胞工程實(shí)驗室經(jīng)常采用甲醛溶液和高錳酸鉀按2比1的比例進(jìn)行薰蒸消毒。產(chǎn)生甲醛是一種無(wú)色但有強烈刺激性的氣體，可與菌體蛋白中的氨基結合使其變性或使蛋白質(zhì)分子烷基化，對細菌、芽胞、真菌、病毒均有效。甲醛通常在水中保存，即甲醛水溶液（福爾馬林）。甲醛對眼睛、嗅覺(jué)和呼吸道有強烈的刺激作用，引起的癥狀主要有流淚、打噴嚏、咳嗽，甚至出現結膜炎、咽喉炎、支氣管痙攣等，還可引起類(lèi)似過(guò)敏性哮喘癥。人對甲醛十分敏感，空氣中游離甲醛含量達到0.1 mg/m3時(shí)，人的眼、鼻、喉就難以忍受。甲醛在人體內會(huì )分解出甲醇，吸入一定量就會(huì )引起人體某種程度的中毒，如麻痹中樞神經(jīng)系統，使人感到疲勞。甲醛還會(huì )損害視網(wǎng)膜，使視力減退并有頭痛癥狀。甲醛與人體中的蛋白質(zhì)反應會(huì )形成對人體有害的不溶（融）物質(zhì)，會(huì )使皮膚失去彈性。甲醛還可能腐蝕肝臟。甲醛甚至還是一種致癌物。

　　因此，在實(shí)驗室用甲醛和高錳酸鉀封閉消毒期間，不宜進(jìn)入消毒空間。消毒后通風(fēng)換氣，等氣味散盡后再出入。

　　2.3 新潔爾滅（苯所溴銨溶液）

　　新潔爾滅（苯所溴銨溶液）為溴化二甲芐基烷銨，是一種表面活性劑。這類(lèi)消毒劑可吸咐在細菌的表面，從而改變細菌細胞壁和細胞膜的通透性，使菌體內的酶、輔酶和代謝產(chǎn)物漏，妨礙細菌的呼吸及糖酵解過(guò)程，并使菌體蛋白變性[4]。此類(lèi)消毒劑具有殺菌力強，無(wú)刺激性、腐蝕性及漂白性，易溶于水，不污染物等特點(diǎn)。在酸性、中性介質(zhì)中殺菌力強，但在酸性介質(zhì)中大減。對結核桿菌、綠膿桿菌、芽胞、真菌和病毒效用差，甚至無(wú)效。 新潔爾滅由于對人體毒性較小，只要在噴灑消毒時(shí)，戴好手套和口罩即可。

　　3、用于外植體表面消毒的消毒劑

　　用于外植體表面消毒的消毒劑次氯酸鹽、過(guò)氧化氫、溴水、氯化汞、酒精等。其中次氯酸鹽和氯化汞在使用過(guò)程中容易造成事故。

　　3.1 次氯酸鹽 次氯酸鹽是一種強氧化劑，主要有次氯酸鈉、次氯酸鈣（又名漂白粉）兩種。由于次氯酸鈣在空所中易吸水潮解，降低滅菌效力，所以更為常用的是次氯酸鈉。次氯酸鈉通常為微黃色或無(wú)色液體，有效氯約為5%。其滅菌原理是由于次氯酸鹽在水中形成次亞氯酸（HClO），次亞氯酸分解成鹽酸和新生態(tài)氧（HClO→HCl + [O-]），[O-]有極強的氧化性，能氧化細菌體內原漿蛋白中的活性基團，并與蛋白中的氨基結合而使其變性，因而起到殺菌作用。這種消毒劑殺菌作用強，對細菌、真菌、芽胞及病毒都有效。雖然次氯酸鈉最后分解為氯氣和氧氣而散逸，因而易于除去，不留殘毒，但產(chǎn)生的刺激性氣體如氯氣和氯化氫卻對人體有毒害作用。這些氣體強烈刺激眼角膜、上呼吸道粘膜等，可引起喉痙孿、喉水腫、支氣管炎和急性腦炎等，重者會(huì )致人窒息死亡。 由于超凈工作臺上存在面向人體的較強的風(fēng)力，在使用這種易揮發(fā)的表面消毒劑對外植體進(jìn)行表面消毒時(shí)，應注意以下幾點(diǎn)：（1）采用封閉的容器對外植體進(jìn)行表面消毒；（2）消毒工作完成后應將消毒廢液及時(shí)倒掉，清理好工作臺后開(kāi)始下一步工作。（3）在進(jìn)行表面消毒操作時(shí)戴好口罩，不宜用手揉眼摸臉等動(dòng)作，以防消毒液對眼睛和皮膚造成傷害。

　　3.2 氯化汞

　　氯化汞（HgCl2）是一種重金屬鹽類(lèi)，Hg2+可與帶負電的細菌蛋白質(zhì)結合，使蛋白變性，酶蛋白失活。氯化汞是一種極強的殺菌劑，但主要對細菌和真菌有效，對芽胞、病毒的效力差，甚至無(wú)效。實(shí)驗動(dòng)物和人在無(wú)機汞中毒后，Hg2+可與體液中的陰離子結合后，形成可擴散的型分子，隨血液循環(huán)進(jìn)入各組織器官，造成內臟器官組織細胞受損，器官功能失調，從面造成整個(gè)有機體代謝失控，表現出各種中毒癥狀如腹瀉、排泄量增加、攝食減少、運動(dòng)遲緩、肝臟各分葉粘連、腎臟水腫、胃腸及腹壁粘連隊等，嚴重時(shí)導致死亡。

　　氯化汞是一種極為有效的殺菌劑，但也是一種劇毒藥品，因而在實(shí)驗室管理中應采取以下嚴格的方法：（1）氯化汞應由至少兩名實(shí)驗管理人員或教師共同掌管，每次進(jìn)貨入庫及使用時(shí)要登記詳細，防止私人帶出實(shí)驗室；（2）采用專(zhuān)門(mén)的藥匙、燒杯、量簡(jiǎn)來(lái)配制，稱(chēng)量后的墊在天平盤(pán)上的紙應及時(shí)清除，配制完后要清洗干凈玻璃器皿和手；（3）在消毒操作過(guò)程中應小心謹慎，避免接觸皮膚，更不能在攪拌或振蕩消毒液時(shí)濺入五官；（4）消毒完成后應及時(shí)倒掉消毒廢液。

　　4、火險

　　火災對實(shí)驗室的威脅最大，一旦發(fā)生，將可能給實(shí)驗室的人員和財產(chǎn)造成嚴重的損失。植物組織培養全過(guò)程幾乎都離不開(kāi)電，因而由于電器設備引起的火險必須相當注意。這種危險可能來(lái)自于電源、開(kāi)關(guān)、電路線(xiàn)年久失修，也可能是保險絲失靈等原因所致。因此應定期檢查實(shí)驗室的線(xiàn)路，確保萬(wàn)無(wú)一失。 另外，植物組織培養中的接種器械如鑷子、解剖刀、手術(shù)剪等的消毒主要采用酒精擦拭或浸泡后在酒精燈上燒烤的方法進(jìn)行，所以在超凈工作臺上進(jìn)行無(wú)菌操作時(shí)也應格外注意，接種器械燒烤時(shí)應遠離裝酒精的容器，更不能剛剛燒完就插入裝酒精的容器中，也要避免不小心將酒精容器或酒精燈碰倒后引起失火。另外，在酒精燈點(diǎn)燃后，不宜用酒精溶液噴灑超凈工作臺。

　　在實(shí)驗室應裝備有滅火器、消防火栓等常規防火設備。

　　總之，在學(xué)生或工作人員在進(jìn)入實(shí)驗室之前進(jìn)行正確操作和安全管理知識的教育是關(guān)鍵，只有使操作者具有一定的安全意識和安全管理知識，才能保證上述危險源不會(huì )釀成真正現實(shí)的危險。